克倫特羅檢測試劑盒檢測原理
本試劑盒是利用競爭ELISA方法,在酶標板微孔上預包被抗克倫特羅抗原。檢測時(shí),加入標準品或樣品溶液,克倫特羅抗體及酶標記物,包被抗原和加入樣本中的克倫特羅競爭性地與克倫特羅抗體結合后,再與酶標記物形成抗原抗體復合物,用TMB底物顯色;加入反應終止液,在450nm波長(cháng)酶標儀下進(jìn)行檢測,樣品中的克倫特羅濃度與吸收光強度成反比。
樣本處理前須知
處理任何樣本時(shí),都須注意:
實(shí)驗中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。
實(shí)驗之前須檢查各種實(shí)驗器具是否干凈,必須使用潔凈實(shí)驗器具,以避免污染干擾實(shí)驗結果。
注意事項
室溫低于20℃或試劑及樣本沒(méi)有回到室溫(20-25℃)會(huì )導致所有標準的OD值偏低。
在洗板過(guò)程中如果出現板孔干燥的情況,則會(huì )出現標準曲線(xiàn)不成線(xiàn)性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進(jìn)行下一步操作。
反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。如不慎滴漏到皮膚上,請盡快用水沖洗。
不要使用過(guò)了有效日期的試劑盒;也不要使用過(guò)了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過(guò)了有效期的試劑盒會(huì )引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
保存試劑盒于2-8℃,不要冷凍,將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封。標準物質(zhì)和無(wú)色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線(xiàn)下。
顯色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),應當棄之。0標準的吸光度(450nm)值小于0.5(A450nm<0.5 )時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。
在加入底物液后,一般顯色15分鐘即可。若顏色較淺,可延長(cháng)反應時(shí)間到20分鐘(或更長(cháng)),但不得超過(guò)30分鐘。反之,則減短反應時(shí)間。
該試劑盒佳反應溫度為25℃,溫度過(guò)高或過(guò)低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。