親和柱原理
 

　　樣品經(jīng)提取液提取、過(guò)濾、稀釋?zhuān)缓笸ㄟ^(guò)鍵合有特殊抗體的免疫親和柱。此時(shí)，分析目標物被親和柱中的抗體特異性的吸附，用水或緩沖液將免疫親和柱上的雜質(zhì)除去，然后用甲醇使抗體變性，從而將目標物從親和柱上洗脫下來(lái)。之后，用檢測儀器進(jìn)行定量檢測。
 

　　親和柱使用要點(diǎn)：
 

　　1、上柱的樣品溶液應該保持酸堿中性、若偏酸或偏堿，可用PBS稀釋調節；
 

　　2、樣品添加回收試驗時(shí)，標準品添加到樣品中，靜置2小時(shí)后或過(guò)夜，再進(jìn)行樣品前處理，否則會(huì )出現回收率偏低的現象。
 

　　3、親和柱樣品過(guò)柱洗脫速度要慢且均勻，約每秒1-2滴；
 

　　4、注意親和柱的柱容量，若超過(guò)柱容量，上柱前請稀釋?zhuān)?br /> 

　　5、如果將標準品直接過(guò)柱驗證回收率時(shí)，一定要確保標準上柱液中有機濃度不要超過(guò)25%，否則會(huì )影響柱子的吸附能力。
 

　　6、儲存條件為4℃-8℃。切記0℃以下的低溫，因為緩沖液凍結，會(huì )嚴重影響親和柱內的物理結構，對質(zhì)量影響很大，同時(shí)注意柱內保護液面，若泄露導致瓊脂干燥萎，請勿使用；
 

　　7、試驗中使用的玻璃儀器等，一定要清洗干凈，尤其是用次氯酸等處理過(guò)的儀器，否則會(huì )使檢測結果偏低。